洪涛 王健伟 孙异临 段淑敏 陈良标 屈建国 倪安平 梁国栋 任丽丽 杨仁全
郭岚 周为民 陈杰 李德新 许文波 徐红 郭元吉 戴淑玲 毕胜利 董小平 阮力
100052北京中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所
目的: 探索2002年未暴发于广东等地的非典型肺炎的病原。
方法: 对来自广东、山西、四川省和北京市的7例非典型肺炎死亡病人的尸体解剖标本进行超薄切片电镜观察,将病人肺组织提取物接种于293细胞(人胚肾转化细胞系),分离病原,对病人组织中和分离的病原进行免疫学鉴定。
结果: 超薄切片电镜观察,在死亡患者的肺(7例)、脾(2例)、肝(2例)、肾(3例)和淋巴结(1例)中均观察到衣原体样包涵体和网质小体、中间体、原生小体颗粒的存在,并在3例病人肺组织中同时见到了冠状病毒样颗粒和未知的基质样结构。用RT-PCR方法从2例病人肺组织中扩增出冠状病毒RNA聚合酶基因片段。将病人肺组织提取物接种于293细胞进行培养,取第2代细胞作电镜观察,也发现衣原体样颗粒和包涵体的存在。在病人组织和培养细胞中见到的衣原体样颗粒均不能与衣原体属特异性抗体和抗肺炎衣原体、鹦鹉热衣原体抗体反应,提示可能为新的衣原体样因子。
结论: 在死亡病人组织和培养细胞中发现的衣原体样和冠状病毒样颗粒,可能是广东等地暴发的非典型肺炎的主要病原。
目前不能排除变异的冠状病毒引起本次暴发疫情的可能。当前,关于非典型肺炎的病原学研究出现了复杂的局面。经过国家疾病预防控制中心和广东省专家的努力,目前已经排除了细菌、支原体、鹦鹉热衣原体、肺炎衣原体、腺病毒、汉坦病毒、流感病毒、麻莎病毒等多种可能引起肺炎的病原。近来WH0和有关研究单位宣布分离到一种新的冠状病毒,并把非典型肺炎改称为冠状病毒肺炎(comnaviruspneumonia)。我们认为,在新的疾病出现初期,关于病原的研究出现不同的报道是不足为奇的。在本文7例尸检标本的研究中,我们在发现衣原体样因子的同时,也特别关注其他可能的病原,并在3例肺标本中也见到了冠状病毒样颗粒,其本质为何,尚需进一步研究。我们也从2例肺组织中,利用RT-PCR技术扩增出与国外报道的序列一致的冠状病毒RNA聚合酶基因片段,表明冠状病毒的存在。究竟衣原体样因子和冠状病毒在非典型肺炎的发病和死亡中发挥何种作用,尚需要进一步的研究。
志谢广东省疾病预防控制中心、广州市疾病预防控制中心、第一军医大南方医院、北京神经外科研究所、北京协和医院、军事医学科学院和北京同仁医院给予大力协助
